菲羅門色譜柱由不銹鋼制成,也可以由厚玻璃,聚合物(例如聚醚乙酮),不銹鋼和玻璃的組合或不銹鋼和聚合物的組合制成。采用不銹鋼材質(zhì)的好處有很多,比如不銹鋼相較于玻璃這種材質(zhì),更加的耐腐蝕,耐高壓,耐磨損,使用壽命更長(zhǎng),這樣也能很好的降低使用成本。
典型的HPLC分析柱長(zhǎng)3至25cm,直徑1至5mm。與GC色譜柱不同,這些色譜柱通常是直的。當(dāng)色譜柱內(nèi)部堆積的顆粒直徑減小時(shí),液相色譜柱的效率將會(huì)提高。
在色譜法中存在兩相,一相是固定不動(dòng)的,我們把它叫做固定相;另一相則不斷流過固定相,我們把它叫做流動(dòng)相。色譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來進(jìn)行分離的。
菲羅門色譜柱的長(zhǎng)度通常在1至100cm之間。氣相色譜法(GC):液相固定相結(jié)合或吸附到毛細(xì)管柱的表面上,或結(jié)合到柱內(nèi)填充的固體載體上。匹配分析物和固定相的極性兩者具有相似的極性,固定相的厚度越厚,分析物的揮發(fā)性就越大。
含有樣品的流動(dòng)相液體通過一固定于柱子或平板上、與流動(dòng)相互不相溶的固定相表面;當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí),混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。
由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同,隨著流動(dòng)相的移動(dòng),混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡,使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測(cè)方法結(jié)合,實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測(cè)。